检测范围
12.5pg/mL - 400pg/mL
用途
于检测血清、血浆、细胞培养上清液和组织等样本中大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF-Ab)的浓度。
检验原理
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。在预包被抗大鼠 GM-CSF-Ab抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入大鼠 GM-CSF-Ab校准品和待测样本，再加入HRP标记的抗大鼠 GM-CSF-Ab抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（酸性溶液）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪450nm波长上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中大鼠 GM-CSF-Ab的浓度正相关。拟合校准品曲线，可以计算出样本中大鼠 GM-CSF-Ab的浓度。
特异性
本试剂盒识别天然大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体(GM-CSF-Ab)，与结构类似物无交叉。
精密度
批内变异系数CV%小于10%；批间变异系数CV%小于15%。
实验所需自备物品
1、能够检测 450 nm 吸光度的酶标仪
2、移液器及枪头、加样槽
3、37℃恒温箱或水浴锅
4、准备试剂用的试管、离心管、量筒等
5、蒸馏水或去离子水
操作步骤
所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
4、样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
5、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
6、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
（提示：为获得理想的实验结果，必须彻底移除残留液体。洗板完成之后，请立即进行下步操作，不要让微孔板干燥。）
7、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
8、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
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