检测范围
0.625ng/mL - 526 ng/mL
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液和组织等样本中大鼠铜蓝蛋白(CP;CER)的浓度。
特异性
本试剂盒识别天然和重组大鼠铜蓝蛋白(CP;CER),与结构类似物无交叉。
精密度
批内变异系数CV%小于10%;批间变异系数CV%小于15%。
实验所需自备物品
1、能够检测 450 nm 吸光度的酶标仪
2、移液器及枪头、加样槽
3、37℃恒温箱或水浴锅
4、准备试剂用的试管、离心管、量筒等
5、蒸馏水或去离子水
操作步骤
所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置标准品孔、0值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,0值孔加样本稀释液50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本50μL。
4、除空白孔外,标准品孔、0值孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL。
5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育60min。
6、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复5次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡30s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
(提示:为获得理想的实验结果,必须彻底移除残留液体。洗板完成之后,请立即进行下步操作,不要让微孔板干燥。)
7、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育15min。
8、所有孔加入终止液50μL,在450nm波长酶标仪上读取各孔吸光度(OD值)。