检测范围
0.3125 ng/mL – 10 ng/mL。
用途
用于检测血清、血浆、细胞培养上清液和组织等样本中人肝配蛋白 B 受体 4（EPHB4） 的 浓度。
特异性
本试剂盒识别天然和重组人肝配蛋白 B 受体 4（EPHB4），与结构类似物无交叉。
精密度
批内变异系数 CV%小于 10%；批间变异系数 CV%小于 15%。
实验所需自备物品
1）能够检测 450 nm 吸光度的酶标仪 2）移液器及枪头、加样槽 3）37℃恒温箱或水浴锅 4）准备试剂用的试管、离心管、量筒等 5）蒸馏水或去离子水 6）涡旋振荡器、微孔板振荡器
操作步骤
所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。 1、按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。 2、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。 3、设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL，0 值孔加 样本稀释液 50μL，空白孔不加，样本孔加待测样本 50μL。 4、除空白孔外，标准品孔、0 值孔和样本孔，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体 100 μL。 5、用封板膜盖住反应板，37℃水浴锅或恒温箱避光孵育 60min。 6、揭开封板膜，弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置 20S，甩去洗涤液，吸水纸 上拍干，如此重复 5 次。若使用自动洗板机，请按洗板机操作程序进行洗板，添加浸泡 30s 的 程序，可以提高检测的精度。洗板结束，加底物前，要在干净不掉屑的纸上，充分拍干反应板。 （提示：为获得理想的实验结果，必须彻底移除残留液体。洗板完成之后，请立即进行下步操 作，不要让微孔板干燥。） 7、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合，所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应 板，37℃水浴锅或恒温箱避光孵育 15min。 8、所有孔加入终止液 50μL，在 450nm 波长酶标仪上读取各孔吸光度（OD 值）。
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