用途
用于定性检测血清、血浆、细胞培养上清液和组织等样本中是否含有山羊布鲁氏菌IgM抗体(Brucella Ab IgM)。
检验原理
试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被山羊 Brucella Ab IgG捕获抗原的包被微孔中，依次加入标本、阴性和阳性对照，再加入HRP标记的检测抗体，经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的山羊 Brucella Ab IgG呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），判定阴阳性。
特异性
本试剂盒识别天然山羊布鲁氏菌IgG抗体(Brucella Ab IgG)，与结构类似物无交叉。
精密度
批内变异系数CV%小于10%；批间变异系数CV%小于15%。
实验所需自备物品
1、能够检测 450 nm 吸光度的酶标仪
2、移液器及枪头、加样槽
3、37℃恒温箱或水浴锅
4、准备试剂用的试管、离心管、量筒等
5、蒸馏水或去离子水
操作步骤
所有试剂和组分都先恢复到室温，标准品、质控品和样品，建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法，配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条，剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；
4、样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。
5、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
6、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
7、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
8、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。
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